1.相信很多小伙伴將質粒電泳后發(fā)現(xiàn)，質粒不是單一條帶，而是出現(xiàn)了很多條帶，例如下圖：

2.質粒為什么出現(xiàn)這樣的情況？

一般理解來說，質粒DNA應如圖2（左）所示的簡單環(huán)狀結構。然而，雙鏈環(huán)狀DNA的分子軸變形或雙螺旋的扭曲，導致閉合環(huán)狀DNA中每個螺旋轉彎的實際堿基對數(shù)量發(fā)生變化，或者導致螺旋軸發(fā)生規(guī)則的空間變形，產(chǎn)生拓撲結構，形成質粒DNA的超螺旋性狀（圖2右）。

因此，不同的拓撲結構將使質粒DNA形成多種形式，包括共價封閉圓形（CCC）形式、開放圓形（OC）形式（也稱為“缺口形式"）和線性形式（通常通過奇特的限制性消化獲得）。在CCC形式中，兩條DNA鏈是共價閉合的，DNA是超螺旋的。這種亞型的結構最緊密。如果DNA斷裂產(chǎn)生缺口，就會產(chǎn)生OC，卷曲也就消失了。當兩條線在同一位置斷裂時，就會產(chǎn)生線性形式。此外，質?？赡芤怨丫垠w形式出現(xiàn)，例如串聯(lián)體，而串聯(lián)體又可能以不同的異構體形式存在。所有這些形式都可以通過瓊脂糖凝膠電泳觀察到。但出現(xiàn)多少種條帶會根據(jù)你的質粒提取技術、質粒的新鮮程度、電泳液的配置以及瓊脂糖凝膠的配置等有所不同。

2.怎么區(qū)分質粒的電泳條帶？

一般來說，質粒遷移速度由快到慢分別是共價封閉原形（超螺旋）形式、線性和開放圓環(huán)（開環(huán)）形式，并伴隨著其他形式。原因是：電泳DNA遷移速率與分子大小和構象相關，分子構象越大，空間位阻阻力越大。超螺旋結構較為緊密，因此跑的快；開環(huán)質粒由于DNA斷開，阻力增大，因此跑的最慢。

3.怎么驗證質粒是否可用？

綜上所述，質粒存在多少條帶與多種因素相關，沒有存在絕對的衡量標準。但如果用限制性內(nèi)切酶消化質粒DNA，只會出現(xiàn)一條清晰的條帶。并且，由于酶切形成線性化DNA片段，其電泳遷移速率會比對照組原始質粒的超螺旋結構速度慢，可以檢驗質粒是否被切開。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產(chǎn)品資訊。

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線，在各個領域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術支持與服務。

可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務。 專業(yè)的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術支持，隨時為客戶提供服務。