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    提取基因組,細胞裂解是用物理方法、化學法還是酶解法?

    發(fā)布時間: 2024-06-06  點擊次數(shù): 1048次

    提取基因組,細胞裂解是用物理方法、化學法還是酶解法?

    1. 物理方法

    2. 化學方法

    大部分用化學法,但也有可能搭配使用。


    細胞裂解的物理放方法指的是機械破碎,如勻漿法、研磨法、超聲波處理法,還有反復凍融的方法。酶解法是將溶菌酶或蛋白酶K將入,使細胞壁破碎?;瘜W法是使用含SDS或CTAB的溶液來對細胞進行處理,在一定的pH環(huán)境和變性條件下,細胞破裂,蛋白質變性沉淀,核酸被釋放到水相


    現(xiàn)在常用的是基因組提取試劑盒,大部分是用化學法裂解的。


    但如果碰上一些特殊的實驗樣本,還需要多種方法搭配使用。


    例如真菌,僅靠化學方法無法有效裂解,理解的方法是先機械破碎,同時搭配破壁酶降解細胞外壁,最后才是化學試劑破壞細胞膜。


    那些擁有堅硬外殼、骨架或復雜的化學外層的樣本,還需要進行一些預處理,例如粗分離,過濾掉大顆粒的雜志。


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